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实时荧光PCR仪简介

文章出处:网责任编辑:作者:人气:-发表时间:2022-11-14 17:26:00【

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CR中文翻译为聚合酶链式反应。自1985年PCR技术发明以来,技术发展已
非常成熟了,PCR仪主要可以划分为三类,即:常规PCR仪、实时荧光定量PCR
仪、数字PCR仪。
我们今天主要讲实时荧光PCR仪
PCR技术在近30年的不断发展创新中,最受瞩目的当属荧光实时定量PCR技
术(real-timequantitativePCR,或qPCR)。
定量PCR技术真正实现了PCR从定性到定量的飞跃,通过对PCR过程的实时
监控,专一、灵敏快速、可重复地精确定量起始模板浓度,已经在科研和临床诊断
领域得到了越来越广泛的应用。
PCR的工作原理是变性、退火、延伸三个步骤。
而对于实时荧光PCR仪的工作原理展开来讲就是:将标记有荧光素的Taqman
探针与模板DNA混合后,完成高温变性、低温复性、适温延伸的热循环,并遵守
聚合酶链反应规律,与模板DNA互补配对的Taqman探针被切断,荧光素游离于
反应体系中,在特定光激发下发出荧光;随着循环次数的增加,被扩增的目的基
因片段呈指数规律增长,通过实时检测与之对应的随扩增而变化荧光信号强度,
求得Ct值(也就是,循环阈值,即:每个反应管内的荧光信号到达设定阈值时
所经历的循环数),同时利用数个已知模板浓度的标准品作对照,即可得出待测
标本目的基因的拷贝数。
这么讲可能你还不能完全理解,那你可以这么去理解,一个实时荧光定量
PCR仪,最关键的是两大系统,一个光电系统,一个温控系统。光电系统是用来
进行光电信号收集和转换的,温控系统是用来维持核酸扩增所需对应温度条件
的。最后电脑自带软件系统会通过相关关系方程式换算出临床定量结果。

此文关键字:实时荧光PCR仪简介

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